以枇杷不同品种和不同器官为外植体，通过对愈伤组织诱导率、诱导状态、熊果酸（UA）和齐墩果酸（OA）含量的综合考虑，筛选适合于悬浮培养的枇杷愈伤组织，并通过调整2,4-D、6-BA浓度，同时加入酸水解酪蛋白（CH）、谷氨酰胺（Gln）、KCl等物质对花丝愈伤组织状态进行调控。结果表明：枇杷‘早钟6号’幼胚诱导的愈伤组织最适用于枇杷悬浮培养，愈伤诱导率为83.70%，愈伤组织嫩黄、疏松、颗粒明显，UA、OA含量分别为6.90、2.34 mg/g dw。在MS中附加2,4-D 6.0 mg/L、6-BA 0.8 mg/L、CH 200 mg/L、KCl 500 mg/L，花丝诱导的坚硬愈伤出现细软、嫩黄的愈伤组织，但多次继代后水渍化，状态不佳。
Different varieties and organs were used as explants, considering the induction rate of callus, the callus state, the ursolic acid (UA) and oleanolic acid (OA) content, we screened the suitable callus for suspension culture of loquat, then by adjusting the concentration of 2,4-D, 6-BA, CH, Gln, and KCl to regulate the status of filaments callus. The results show that: the callus inducted from loquat (cultivar ‘Zaozhong 6’) immature embryo was the most suitable for suspension culture, the callus induction rate was 83.70%, and it was yellow, loose, granular significantly, the content of UA and OA were 6.90 mg/g dw and 2.34 mg/g dw respectively. The callus of filaments in MS added 2,4-D 6.0 mg/L, 6-BA 0.8 mg/L, CH 200 mg/L and KCl 500 mg/L, turned to toft and yellow. But after the repeated subculture, the callus appeared water-soaking, poor state.
[1] 黄镜,孙燕. 熊果酸的抗肿瘤活性[J]. 中国新药杂志, 1997,6(2): 101-104.
[2] 陈武,熊筱娟,李开泉,等. 乌索酸的化学、药理及临床研究[J]. 宜春医专学报, 2001,13(2): 123-126.
[3] 赵志栋,高宁. 熊果酸抗肿瘤作用分子机制的研究进展[J]. 中华肿瘤防治杂志, 2011,18(24): 1969-1972.
[4] Mustafa N R, de Winter W, van Iren F, et al. Initiation, growth and cryopreservation of plant cell suspension cultures[J]. Nature Protocols, 2011,6(6): 715-742.
[5] Smetanska I. Production of secondary metabolites using plant cell cultures[J]. Advances in Biochemical Engineering Biotechnology, 2008(111): 187-228.
[6] 王家福,刘月学,宋刚,等. 枇杷胚性愈伤组织的诱导和保存[J]. 福建农业大学学报, 2000(29): 305-310.
[7] 彭晓军,王永清. 枇杷胚乳愈伤组织诱导和不定芽发生的研究[J]. 四川农业大学学报, 2002(20): 228-231.
[8] 王芳,吕洪飞,徐红霞,等. 枇杷幼叶组织培养与植株再生研究[J]. 生物技术通讯, 2011(22): 53-56.
[9] 音建华. 枇杷离体培养及其在遗传转化与种质保存中的应用[D]. 福州: 福建农林大学硕士学位论文, 2010.
[10] Li J Q, Wang Y Q, Lin L H, et al. Embryogenesis and plant regeneration from anther culture in loquat (Eriobotrya japonica L.)[J]. Scientia Horticulturae, 2008(115): 329-336.
[11] 杨凤玲,林顺权. 枇杷叶片愈伤组织的诱导与保存[J]. 亚热带植物科学, 2006,34(4): 1-5.
[12] 陈红,王永清. 枇杷花药培养诱导愈伤组织的研究[J]. 安徽农业科学, 2007,35(27): 8453-8454.
[13] 邓朝军,章希娟,郑姗,等. 枇杷茎尖愈伤组织诱导及种质体外保存研究[J]. 福建果树, 2011(1): 1-6.
[14] 彭晓军,王永清. 枇杷胚乳愈伤组织诱导和不定芽发生的研究[J]. 四川农业大学学报, 2002,20(3): 228-231.
[15] 陈莉,窦秉德,程朝霞,等. 甜玉米成熟胚和幼胚再生性比较分析[J]. 湖北农业科学, 2009,48(3): 519-521.
[16] 陈靖,董浩,马海珍,等. 玉米幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段愈伤诱导及其植株再生的比较[J]. 中国农业科学, 2011,44(17): 3676-3682.
[17] Brown P D, Tokuhisa J G, Reichelt M, et al. Variation of glucosinolate accumulation among different organs and developmental stages of Arabidopsis thaliana[J]. Phytochemistry, 2003,62(3): 471-481.
[18] 赵得萍,唐道城,刘米会,等. 东方百合花器官组织培养研究[J]. 北方园艺, 2008(2): 198-200.
[19] 张艺萍,吴丽芳,吴学尉,等. 东方百合胚性愈伤组织诱导和植株再生研究[J]. 江西农业学报, 2009,20(12): 33-36.
[20] 苟克俭,任茜. 甘草花丝的胚性愈伤组织诱导及其体细胞胚的发生[J]. 西北农业大学学报, 1993,21(3): 107-109.
[21] 秦静远. 白鹤芋花丝体细胞胚的诱导及快繁技术[J]. 中国农学通报, 2006,21(9): 67-69.
[22] 姚绍嫦,艾素云,杨美纯,等. 亚洲百合花丝离体培养器官形成的细胞形态学研究[J]. 广西植物, 2009(6): 812-816.
闽公网安备 35020602000789号