花生AhAO1蛋白的原核表达、纯化及抗体制备

doi:10.3969/j.issn.1009-7791.2010.04.002

亚热带植物科学 ›› 2010, Vol. 39 ›› Issue (04): 4-6.DOI: 10.3969/j.issn.1009-7791.2010.04.002

花生AhAO1蛋白的原核表达、纯化及抗体制备

杨丽霞^1,2,宋涛平¹,彭新凯¹,胡朝晖¹,李玲²

1. 长沙市食品质量安全监督检测中心, 湖南长沙 410013;
2. 华南师范大学生命科学学院, 广东省植物发育生物工程重点实验室, 广东广州 510631

收稿日期:2010-06-28 出版日期:2010-12-10 发布日期:2010-12-10
作者简介:杨丽霞(1981-),女,河南安阳人,博士,从事植物分子生物学研究。
基金资助:
教育部科学技术研究重点项目(03098)

Prokaryotic Expression,Purification and Polyclonal Antibody Preparation of Peanut AhAO1 Protein

YANG Li-xia^1,2, SONG Tao-ping¹, PENG Xin-kai¹, HU Zhao-hui¹, LI Ling²

1. Changsha Center of Supervision & Inspection on Food Quality Safety, Changsha 410013, Hunan China;
2. Guangdong Key Lab of Biotechnology for Plant Development, College of Life Science, South China Normal University, Guangzhou 510631, Guangdong China

Received:2010-06-28 Online:2010-12-10 Published:2010-12-10

摘要/Abstract

摘要： 采用RT-PCR方法,以花生叶片RNA逆转录得到的cDNA为模板,扩增出AhAO1基因片段,将其插入原核表达载体pPROEXHTa中,构建AhAO1基因片段原核表达载体HTaAhAO1,经PCR和测序确证后,以IPTG诱导其在E.coli BL21中高表达His-AhAO1融合蛋白,采用亲和层析柱与电泳纯化融合蛋白。用纯化的His-AhAO1融合蛋白制备抗体,为分析AhAO1的功能奠定基础。

关键词: 花生, AhAO1, pPROEXHTa, 原核表达, 抗体

Abstract: The AhAO1 gene was isolated by RT-PCR using cDNA synthesized from total RNA extracted from peanut leaves and cloned into plasmid pPROEXHTa.The expression plasmid HTaAhAO1 was transformed into E.coli BL21.SDS-PAGE analysis revealed that the His-AhAO1 fusion protein was highly expressed in E.coli BL21 and purified by affinity chromatography and electrophoresis.The His-AhAO1 polyclonal antibody was prepared and tested by western blot.The anti-His-AhAO1 polyclonal antibody lays foundation for further research on AhAO1.

Key words: Arachis hypogaea, AhAO1, pPROEXHTa, prokaryotic expression, antibody

中图分类号:

Q943.2

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Prokaryotic Expression,Purification and Polyclonal Antibody Preparation of Peanut AhAO1 Protein

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