亚热带植物科学 ›› 2009, Vol. 38 ›› Issue (04): 27-30.DOI: 10.3969/j.issn.1009-7791.2009.04.008

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黄皮SRAP反应体系优化正交实验研究

杨向晖1,黄建峰1,傅嘉欣1,谢江辉2   

  1. 1. 华南农业大学 园艺学院, 广东 广州 510642;
    2. 中国热带农业科学院 南亚热带作物研究所, 广东 湛江 524091
  • 收稿日期:2009-09-23 出版日期:2009-11-10 发布日期:2009-11-10
  • 作者简介:杨向晖(1971-),男,湖南邵东人,副教授,博士,从事果树种质资源与生物技术研究。
  • 基金资助:

    中国热带农业科学院南亚热带作物研究所非营利性科研机构开放基金项目(sscriqd200804)

Optimization for SRAP-PCR System of Clausena lansium Based on Orthogonal Design

YANG Xiang-hui1, HUANG Jian-feng1, FU Jia-xin1, XIE Jiang-hui2   

  1. 1. College of Horticulture, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong China;
    2. South Subtropical Crops Research Institute, CATAS, Zhanjiang 524091, Guangdong China
  • Received:2009-09-23 Online:2009-11-10 Published:2009-11-10

摘要: 以黄皮(Clausena lansium)‘甜黄皮’品种为试材,利用正交设计L16(45)对黄皮SRAP-PCR反应体系中的5因素(Taq聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物)在4个水平上进行优化试验。结果表明,不同因素对黄皮SRAP反应体系影响从大到小的顺序为:Mg2+Taq聚合酶> 模板DNA> 引物> dNTPs;初步确立了适合黄皮的SRAP-PCR扩增体系为:在25 μl反应体系中,包括10×PCR buffer 2.5 μl、Taq DNA聚合酶0.75U、Mg2+ 2.0 mmol/L、模板DNA 60 ng、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.2 μmol/L。

关键词: 黄皮, SRAP, 正交设计, 优化

Abstract: The orthogonal design was used to optimize SRAP-PCR amplification system on Clausena lansium on four levels of five factors (Taq polymerase,Mg2+,DNA template,dNTPs,and primer,respectively).The results indicated that the order of each factor in different levels affected on the result of PCR was Mg2+ or Taq polymerase,DNA template,primer and dNTPs.An optimal SRAP-PCR system was established,that was total 25 μl reaction system containing PCR10×Buffer 2.5 μl,0.75U DNA polymerase,2.0 mmol/L Mg2+,60 ng DNA template,0.2 mmol/L dNTPs,and 0.2 μmol/L primer.

Key words: Clausena lansium, SRAP, orthogonal design, optimization

中图分类号: